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Responsabile, orari e contatti:

Prof. Giuseppe Gallo, Dipartimento di Scienze e Tecnologie Biologiche, Chimiche e Farmaceutiche, Università degli Studi di Palermo, Viale delle Scienze, Ed. 16, 90128, Palermo.

Orario: 9.30-19.00

Email: giuseppe.gallo(at)unipa.it, Tel.: +3909123897312.

Breve descrizione:

Il laboratorio di Biosintesi e Produzione in Camera Bianca è equipaggiato per condurre analisi coltura-dipendente e molecolari in ambito microbiologico con particolare riferimento alle fermentazioni di specifici ceppi microbici per la produzione, purificazione e analisi funzionale di molecole e macromolecole di interesse in diversi ambiti quali quello biomedico, farmaceutico e agronomico, sia ai fini della ricerca scientifica che per le applicazioni industriali. La dotazione e la funzionalità della Camera Bianca permettono di svolgere le operazioni di biosintesi, purificazione e confezionamento del prodotto in forma di liofilizzato in condizioni controllate secondo le procedure EU Good Manufacturing Practice (EU GMP).

Servizi erogati:

• biosintesi di macromolecole (i.e. proteine ed enzimi ricombinanti e non ricombinanti) e metaboliti bioattivi (antibiotici, antitumorali; ormoni vegetali) mediante colture di appositi ceppi microbici in terreni solidi e liquidi, quest’ultime condotte sia in scala di laboratorio (i.e. 0,1 - 200 mL) che in scala pilota o preindustriale in appositi fermentatori (i.e. 15 - 150 L);
• purificazione dal mezzo di coltura esausto di fermentazione di macromolecole e metaboliti bioattivi tramite sistemi di separazione, filtrazione tangenziale e cromatografia;
• produzione, purificazione e caratterizzazione di nano-vescicole extracellulari e di nanoparticelle metalliche di origine microbica;
• biosintesi, purificazione e confezionamento dei prodotti nella forma liofilizzata in condizioni controllate in Camera Bianca, secondo le procedure EU Good Manufacturing Practice (EU GMP);
• analisi cromatografiche per la determinazione del grado di purezza del campione, del punto isoelettrico, della idrofobicità;
• analisi elettroforetica di estratti proteici mediante SDS-PAGE e caratterizzazione tramite western blotting;
• analisi zimografica per attività idrolitiche su substrati specifici e determinazione di substrati sintetici di attività enzimatiche mediante analisi spettrofluorimetriche;
• saggi condotti usando prodotti purificati o il brodo coltura esausto di fermentazione per la determinazione di attività antimicrobica, anti-biofilm microbici e antitumorale;
• saggi per la determinazione di attività di promozione della crescita delle piante;
• determinazione della presenza di endotossine;
• analisi molecolari di comunità microbiche basate sul sequenziamento del DNA metagenomico e/o su tecniche di isolamento e caratterizzazione;
• preparazione di sezioni istologiche al microtomo criostato;
• valutazione dell’efficienza di filtrazione batterica di tessuti e membrane.

 

Attrezzature presenti nel laboratorio:

Camera Bianca

• Liofilizzatore Epsilon 2-6D LSC CR (CHRIST);
• Omogeneizzatore PANTHER NS3006L (GEA NIRO SOAVI);
• Sistema per filtrazione tangenziale QUATTRO SYSTEM;
• Centrifuga industriale Z 41 (Carl Padberg CEPA);
• Fermentatore 20 Litri (Solaris Biotechnology);
• Fermentatore 200 Litri (Solaris Biotechnology);
• Autoclave Vapour Line (Vwr);
• Incubatore con agitazione Certomat T Plus (Sartorius Stedim Biotech);
• 2xCappa Safe 2020 (Thermo);
• Centrifuga Mega Star 1.6r (VWR).

Laboratorio di biosintesi

• Purelab Option Q15 (ELGA);
• Autoclave per sterilizzazione a vapore completa di cestello VAPORLINE 135-B (VWR);
• Ultracongelatore ULUF550 e accessori (ARCTIKO);
• Bagno termostatato WB- M 15lt con coperchio;
• Centrifuga refrigerata SL40FR (Thermo Scientific™);
• Centrifuga da banco CL17 (Thermo Scientific™);
• Centrifuga da banco refrigerata CL17R (Thermo Scientific™);
• Centrifuga refrigerata SL16R (Thermo Scientific™);
• Centrifuga refrigerata AVANTI J 26S XP (Beckman coulter) con rotori (JLA-8.1000, JA-10, JA-20.1 e JA-25.50);
• Stufa termostatica a ventilazione forzata UF75 (Memmert GmbH);
• Incubatore a CO₂ e accessori, con decontaminazione a 160 gradi (MMM Group);
• Cappa biologica a flusso laminare Safe 2020 Class II Biological Safety (Thermo Scientific™);
• Cappa biologica a flusso laminare con lampada germicida ASALAIR BIOHAZARD 1200;
• Chromatography System Akta Start e accessori (GE Healthcare);
• Chromaster HPLC System 600bar UV Pack e accessori (HITACHI-VWR);
• T100 Thermal cycler (Biorad);
• Bagno a ultrasuoni (FALC);
• Termomixer F1.5 (Eppendorf);
• Bilancia analitica (RADWAG);
• Spettrofotometro SPECTROSTAR NANO (BMG LABTECH);
• System CHEMIDOC MP e accessori (BIORAD);
• Microscopio ottico rovesciato e accessori AXIO Vert.A1 (ZEISS);
• Sistema Laser Dissection Microscope LMD6500 e accessori (Leica);
• Leica CM 1520 cryostat per sezioni istologiche;
• Sonicatore a ultrasuoni HD-2080 e accessori;
• Sistema per “Bacterial filtration efficiency” Bulldog AERO e BASIC con impattatore a 6 stadi per cellule batteriche.

Attività didattica, scientifica e conto terzi:

• visite guidate per illustrare le funzionalità e le applicazioni della Camera Bianca; seminari divulgativi sulle biotecnologie microbiche e le biosintesi microbiche;
• conduzione di sperimentazioni nell’ambito delle: biotecnologie microbiche che includono isolamento di ceppi produttori e/o costruzione di ceppi ingegnerizzati, ottimizzazione delle condizioni di crescita per la produzione di biomolecole di interesse e loro purificazione; analisi della struttura della comunità microbica mediante estrazione del DNA metagenomico;
• collaborazioni e accordi con ricercatori accademici o con aziende (i.e. Abiel srl) operanti nel settore delle scienze della vita e delle biotecnologie.

Campi di applicazione:

• Attività di ricerca scientifica e dell’industria nei settori delle biotecnologie biomediche e farmaceutiche e della green and circular economy.