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1. Titolo del Progetto

"Malattia celiaca e localizzazioni extra-tenue: studi sperimentali sulla mucosa orale e sue potenzialità diagnostiche. Indagini di microscopia, immunofluorescenza, colture cellulari,genomica ed immunoistochimica"

Acronimo: 

Codice identificativo progetto: PRJ-xxxx - 2005069443

CUP:

2. Responsabile Scientifico e Unità Coinvolte

Principal Investigator	Prof. Carroccio Antonio
Istituzione coordinatrice	Sede 1 Ente: Università degli Studi di PALERMO - Dip. Promise Responsabile: CARROCCIO Antonio Finanziamento: 25.500,00 €
Unità associate – Associated Investigator	Sede 2 Ente: Università degli Studi di PALERMO - Dip. Meprecc Responsabile: GIULIANA Giovanna Finanziamento: 12.000,00 € Sede 3 Ente: Università degli Studi di FOGGIA Responsabile: BUFO Pantaleo Finanziamento: 28.500,00 € Sede 4 Ente: Università Politecnica delle MARCHE Responsabile: PROCACCINI Maurizio Finanziamento: 20.000,00 €
Durata del progetto	Durata in mesi: 24
Finanziamento totale	86.000,00 €

 

Il progetto di ricerca PRIN 2025 (codice 2005069443), coordinato dal Prof. Antonio Carroccio dell'Università degli Studi di Palermo, indaga il coinvolgimento della mucosa orale come sito di localizzazione extra-intestinale della malattia celiaca.

L'obiettivo principale della ricerca è convalidare un approccio diagnostico mini-invasivo alternativo o complementare alla tradizionale biopsia duodenale (il gold standard attuale). Lo studio sfrutta il prelievo della mucosa orale (biopsia del cavo orale clinicamente sano o affetto da lesioni) per mappare la risposta immunitaria indotta dal glutine tramite un protocollo multidisciplinare e tecniche di laboratorio avanzate.

3.1. Metodologie di Indagine del Progetto

Il protocollo sperimentale del gruppo del Prof. Carroccio integra cinque pilastri metodologici per analizzare i campioni bioptici della mucosa orale:

                                            ┌──► Microscopia (Ottica/Elettronica) ──► Alterazioni strutturali e infiltrazione di IELs
                                            │
                                            ├──► Immunofluorescenza ────────────────► Depositi di IgA anti-tTG2 e EMA in vitro
                                            │
 Campione di Mucosa Orale ──┼──► Colture Cellulari ed d'Organo ─────► Sfida in vitro con gliadina (produzione anticorpi)
                                            │
                                            ├──► Genomica ──────────────────────────► Profili di espressione genica e predisposizione HLA
                                            │
                                            └──► Immunoistochimica ─────────────────► Caratterizzazione fenotipica dei linfociti T (CD3+/CD8+)

1. Indagini di Microscopia

Cosa valuta: L'architettura del tessuto epiteliale e connettivo della mucosa orale.

Applicazione: Studio dei cambiamenti istologici micromorfologici, come l'eventuale alterazione dell'altezza dei processi epiteliali e l'infiltrazione dei linfociti intraepiteliali (IELs), mimando l'analisi che comunemente si esegue sulla mucosa intestinale (classificazione di Marsh).

2. Immunofluorescenza (Diretta e Indiretta)

Cosa valuta: La presenza e la localizzazione di autoanticorpi organo-specifici.

Applicazione: Identificazione dei depositi tissutali di immunoglobuline A (IgA) diretti contro la transglutaminasi tissutale (anti-tTG2) ed anticorpi anti-endomisio (EMA) direttamente all'interno della mucosa della bocca.

Rappresenta un forte marker predittivo e diagnostico di celiachia, anche in assenza di atrofia intestinale conclamata.

3. Colture Cellulari e d'Organo

Cosa valuta: La reattività immunitaria dinamica del tessuto ex vivo.

Applicazione: I frammenti di mucosa orale prelevati vengono mantenuti in coltura a breve termine e sottoposti a sfida (challenge) in vitro con gliadina (la frazione tossica del glutine).

I ricercatori misurano la secrezione de novo di anticorpi anti-tTG/EMA e il rilascio di citochine infiammatorie nel liquido di coltura, dimostrando la capacità della mucosa orale di rispondere attivamente all'insulto antigenico.

4. Genomica

Cosa valuta: I profili di espressione genica e la suscettibilità molecolare.

Applicazione: Analisi tramite tecniche di PCR quantitativa o sequenziamento dell'RNA dei geni deputati alla risposta infiammatoria e alla barriera mucosa.

Permette inoltre di correlare l'attivazione della mucosa orale con la presenza degli aplotipi di predisposizione genetica classica HLA-DQ2 e HLA-DQ3.

5. Immunoistochimica

Cosa valuta: La tipizzazione delle sottopopolazioni cellulari infiltranti il tessuto.

Applicazione: Utilizzo di anticorpi monoclonali specifici per mappare il fenotipo dei linfociti (es. linfociti T CD3+, CD8+ e recettori TCR \(\gamma\delta\)) infiltrati nell'epitelio orale. Questo permette di tracciare un profilo immunologico sovrapponibile a quello riscontrato a livello intestinale.